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瓊脂糖生物配制實(shí)驗(yàn)步驟
點(diǎn)擊次數(shù):2535 更新時(shí)間:2017-05-16

VE Elisa Kit試劑配制 
5×TBE緩沖液:450 mmol/L Tris-硼酸,10 mmol/L EDTA,pH值8.0。使用時(shí)將上述儲(chǔ)存液稀釋10倍至0.5×TBE緩沖液,可同時(shí)作為電泳及制膠用的緩沖液。
制膠
根椐制膠量及凝膠濃度,在加有一定量的電泳緩沖液的三角錐瓶中,加入準(zhǔn)確稱量的瓊脂糖粉(總液體量不宜超過錐瓶的50%容量)。粉末與0.5×TBE buffer的比例,常用瓊脂糖濃度為0.7-1%。
在錐瓶的瓶口上蓋上保鮮膜或牛皮紙,并在膜或紙上扎些小孔,然后在微波爐中加熱溶解瓊脂糖。加熱時(shí),當(dāng)溶液沸騰后,請(qǐng)戴上防熱手套,小心搖動(dòng)錐瓶,使瓊脂糖充分均勻溶解。此操作重復(fù)數(shù)次,直至瓊脂糖*溶解。使溶液冷卻至50℃-60℃左右,如需要可在此時(shí)加入溴化乙錠溶液分混勻。
將瓊脂糖溶液倒入制膠模中,然后在適當(dāng)位置處插上梳子。凝膠厚度一般在3~5 mm之間。制膠模如下圖所示,小膠倒入25-30 mL左右瓊脂糖溶液,大膠則60-70 mL左右,若需切膠回收,凝膠可適當(dāng)加厚。
VE Elisa Kit在室溫下使膠凝固,大約30分鐘~1小時(shí)。
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